導讀：金線蓮Anoectochilusroxburghii（wall.）lindl為蘭科開唇蘭屬多年生草本，其種子自然萌發(fā)率和繁殖率低，利用組培技術快速繁殖種苗，對金線蓮的開發(fā)利用和野生資源保護具有現(xiàn)實意義。筆者特將對金線蓮組織培養(yǎng)幾種培養(yǎng)基篩選結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

取金線蓮幼嫩莖段為外植體。

1.2 外植體滅菌

取生長健壯且無病蟲害的金線蓮幼嫩莖段，去葉，放入低濃度的洗衣粉水中漂洗3-5分鐘，然后用自來水沖洗干凈，用75%酒精滅菌3-5秒，用0.1%的升汞滅菌15分鐘，再用無菌水沖洗5-6次，將消毒好的材料切成有1-2節(jié)、帶腋芽的莖段，接種在Ar + 6-BA 1.0mg/L + NAA0.5mg/L培養(yǎng)基上（Ar為MS改良培養(yǎng)基，大量元素減半，微量元素加倍），pH5.8，蔗糖2%、瓊脂粉0.7%。

培養(yǎng)條件：溫度（25±1）℃，光照時間8-10小時/天，光照強度1500-2000lx。

1.3 不同激素濃度繼代增殖培養(yǎng)基篩選

將分化出的叢生芽分割轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基Ar + 6-BA 1-4mg/L + NAA0.1-0.8mg/L + IBA 0.2mg/L + KT 0.5mg/L，培養(yǎng)基附加糖3%、瓊脂粉0.7%，pH5.8。培養(yǎng)條件同上。通過改變6-BA和NAA的濃度，共為7個處理（每個處理接種三瓶，每瓶5個接種塊），經(jīng)繼代增殖培養(yǎng)，篩選培養(yǎng)基的 很佳培養(yǎng)配方。

1.4 不同添加物壯苗培養(yǎng)基篩選

將幼苗轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基Ar加入或不加入10%馬鈴薯、10%香蕉等添加物+糖 3% + AC 0.2%；培養(yǎng)基均加入瓊脂粉0.7%，pH5.8。培養(yǎng)條件同上。試驗設培養(yǎng)基中添加10%馬鈴薯，添加10%香蕉，添加10%馬鈴薯+10%香蕉，不添加馬鈴薯和香蕉（對照）等4種處理，以篩選 很佳添加物壯苗培養(yǎng)基配方。

1.5 不同激素濃度對生根的影響

不定芽伸長至3-4厘米時，自基部切下，接種到生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基為Ar + NAA 0.1-2.0mg/L + IBA 0.2-0.5mg/L + 糖3% + AC 0.2%，培養(yǎng)基均加入瓊脂粉0.7%，pH5.8，共設8個處理，每處理接種5瓶，每瓶接種5株，培養(yǎng)條件同上，以篩選 很佳的生根培養(yǎng)基。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素濃度對不定芽繼代增殖的影響

試驗結(jié)果（表1）：培養(yǎng)15天時，7種處理有的開始分化出不定芽，60天后7個處理中以處理第6組BA 2.0 + NAA 0.4 + IBA 0.2 + KT 0.5為 很佳，分化出的不定芽為叢生狀，且多達90個小芽，生長粗壯，分化率達100%，增殖倍數(shù)6。其次是處理第2組BA 2.0 + NAA 0.2 + IBA 0.2 + KT 0.5，不定芽總數(shù)81個，生長粗壯分化率100%，增殖倍數(shù)5.4。試驗表明，芽的分化和增殖與BA、NAA濃度有密切關系，一定量的BA、NAA對不定芽有促進分化和增殖的作用。

2.2 不同添加物對幼苗生長的影響

培養(yǎng)60天后的觀察結(jié)果（表2）表明：添加10%馬鈴薯、香蕉等添加物能顯著地促進幼苗的分化、生長，各項分化、生長指標都明顯高于對照，其中以添加10%馬鈴薯和10%香蕉的分化、生長 很好；其次為添加10%香蕉和10%馬鈴薯的，然而污染率也隨加入添加物而增加，幼苗分化、生長愈好的，污染愈重。

2.3 生根培養(yǎng)

當幼苗伸長到3-4厘米高時從基部切下，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上。培養(yǎng)60天后的觀察結(jié)果（表3）表明：在處理第6組IBA 0.5 + NAA 0.5和處理第7組IBA 0.5 + NAA 1.0的兩種培養(yǎng)基上，12天后開始生根，60天后不定根的生根率達到100%。平均每株苗的根數(shù)3.8條或4.0條，不定根平均伸長2.8厘米或3.1厘米，苗生勢粗壯，生長 很好；而處理第1、5組的生根率分別為87%和93%，不定根少，幼苗生勢弱，生長 很差?？梢钥闯觯欢康腎BA和NAA對不定根的誘導有促進作用。

2.4 移栽

幼苗在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)50-60天，長至5-6厘米時，將瓶苗搬到溫室大棚或陰涼通風處經(jīng)7-10天的適應性煉苗，便可洗苗移栽。栽培基質(zhì)以森林腐殖土、河沙、珍珠巖按7 : 2 : 1的比例配制，用1%-2%的多菌靈或高錳酸鉀液噴淋消毒。將生根苗的培養(yǎng)基洗凈，用1%的多菌靈水浸泡10分鐘，晾干，移栽于消毒好的基質(zhì)上，用無紡布保濕10-15天，移栽成活率可達98%以上。

3 討論

a. 金線蓮在繼代增殖培養(yǎng)過程中加入一定量的KT可促進芽的分化和增殖。金線蓮對6-BA不敏感，當培養(yǎng)基中的6-BA濃度達到4mg/L仍未出現(xiàn)畸形苗，但在培養(yǎng)過程中6-BA有積累效應，應根據(jù)苗的生勢確定6-BA的用量。對金線蓮的組培快繁的基本培養(yǎng)基、外源激素的濃度和添加物等因素的試驗表明：Ar + 6-BA 2.0 + NAA 0.4+ IBA 0.2 + KT 0.5是適合的繼代增殖培養(yǎng)基；Ar + 糖 3% + AC 2%的培養(yǎng)基添加10%香蕉和10%馬鈴薯能顯著促進幼苗的分化和生長；Ar + IBA 0.5+NAA 0.5 +糖 2% + AC 0.2%是適于生根的培養(yǎng)基。

b. 金線蓮煉苗時，對基質(zhì)要求不嚴，腐殖土、河沙、珍珠巖等基質(zhì)，成苗率可達98%以上。但蟲害為害嚴重，主要有毛毛蟲、小螺絲、蝸?？惺橙~片或幼嫩莖尖，植株慢慢枯死，因而，煉苗時要注意防蟲，或者避開高溫高濕季節(jié)（蟲害高發(fā)期）煉苗，每年10月至翌年4月是 很佳的煉苗季節(jié)。

編者按：本文作者：高燕、白燕冰、趙云翔，由小編整理發(fā)布