草莓(Fragaria spp．)為薔薇科多年生草本植物，是重要的漿果植物。其果實(shí)顏色鮮艷、營(yíng)養(yǎng)豐富，可鮮食，是良好的配餐食品，也可加工成果醬、果酒等。其促成栽培的迅速發(fā)展，填補(bǔ)了水果的淡季市場(chǎng)。

脫毒苗繁育工藝流程如圖4-15所示。

2.1 熱處理脫毒

草莓植株先栽種于用熱處理的特定容器內(nèi)生長(zhǎng)1～2個(gè)月，使其根系健壯生長(zhǎng)，以增加對(duì)高溫的抵抗能力。然后放人恒溫箱中，保持光照16 h/d，光照強(qiáng)度5000 lx，晝溫38℃，夜溫35℃。處理的時(shí)間因病毒種類而異。如38℃的恒溫培養(yǎng)12～15 d即可脫去草莓斑駁病毒；草莓輕型黃斑病毒和草莓鑲脈病毒，因耐熱性強(qiáng)，需在38℃恒溫條件下處理50 d熱處理之后再進(jìn)行微莖尖培養(yǎng)則脫毒比較徹底，即便所取微莖尖稍大一點(diǎn)，也可以培育出無(wú)病毒苗，且能提高外植體的成活率。

2.2 微莖尖培養(yǎng)脫毒與快繁

2.2.1 外植體的選擇與處理。

取經(jīng)過(guò)熱處理的草莓母株上新抽出的匍匐莖作外植體，以每年6～7月 很為適宜。如果母株沒(méi)有經(jīng)過(guò)熱處理，則于7～8月匍匐莖發(fā)生 很旺盛的時(shí)期，在無(wú)病蟲(chóng)害的田塊，連續(xù)晴天3～4 d時(shí)選取生長(zhǎng)健壯、新萌發(fā)且未著地的3 cm長(zhǎng)匍匐莖梢作外植體。然后用肥皂水洗刷，流水沖洗2 h，剝?nèi)ネ鈱尤~片，75％的酒精浸泡30 S，除去表面的蠟質(zhì)，2％～3％次氯酸鈉溶液(加數(shù)滴0.1％吐溫20或吐溫80)浸泡15～20 min，無(wú)菌水沖洗3～5次進(jìn)行材料表面滅菌， 很后用無(wú)菌濾紙吸干表面水分。在無(wú)菌條件下借助解剖鏡將芽外面的幼葉和部分葉原基除去，使生長(zhǎng)點(diǎn)暴露，然后用解剖刀切下帶有1～2個(gè)葉原基、0.2～0.5 mm大小的微莖尖，迅速接入MS、BA 0.5 mg/L，NAA 0.25 mg/L或White、IAA 0.1 mg/L的初代培養(yǎng)基上。

2.2.2 初代培養(yǎng)。

微莖尖接種后，放置于25±2℃、光照16～18 h/d，光照強(qiáng)度2000～3000 lx的條件下培養(yǎng)。1～2個(gè)月后莖尖生長(zhǎng)并分化出芽叢。若在低溫和短日照條件下，莖尖可能進(jìn)入休眠，所以應(yīng)保持較高的溫度和充足的光照時(shí)間。

2.2.3 繼代培養(yǎng)。

將芽叢切割成有3～4個(gè)芽的芽叢轉(zhuǎn)入MS、6-BA 1 mg/L繼代培養(yǎng)基上，每瓶放置3～4個(gè)芽叢，經(jīng)過(guò)3～4周的培養(yǎng)可獲得由30～40個(gè)腋芽形成的芽叢。在轉(zhuǎn)接過(guò)程中，去掉原生葉片有利于新苗的分化；增殖培養(yǎng)中隨時(shí)清除愈傷組織，有利于芽苗的增殖和生長(zhǎng)。在轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基前一次繼代培養(yǎng)時(shí)，改換培養(yǎng)基為MS、6-BA 0.5 mg/L，以利于形成壯苗。

2.2.4 生根培養(yǎng)。

將長(zhǎng)到2cm長(zhǎng)的草莓苗接種到1/2 MS、IBA 0.1 mg/L的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生根率達(dá)100％，平均根條數(shù)為2.4條。培養(yǎng)基中不附加IBA或IBA濃度超過(guò)0.2 mg/L，多數(shù)芽苗都在基部切口處產(chǎn)生愈傷組織，隨后在愈傷組織上分化生根，致使成活率大大降低。另外，也可以將具有兩片以上正常葉的芽苗在試管外生根。

注意在繼代增殖和生根培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度控制在18～26℃范圍內(nèi)，瓶苗可以正常生長(zhǎng)及發(fā)根；而在28℃以上時(shí)，綠苗普遍變黃，生根率降低，根尖發(fā)黃老化，容易產(chǎn)生玻璃化苗現(xiàn)象。

2.2.5 移栽。

當(dāng)生根培養(yǎng)15～20 d時(shí)，試管苗根多且粗壯。當(dāng)主根長(zhǎng)1.5 cm左右，白色無(wú)須根、葉大而厚、深綠，具3片以上葉片時(shí)可以馴化移栽。栽培基質(zhì)為腐熟的鋸木屑或腐葉土，也可采用蛭石與珍珠巖配比為1：1或園土與煤渣配比為2：1的復(fù)合基質(zhì)。溫室內(nèi)或塑料拱棚內(nèi)溫度要控制在15～20℃，濕度維持在80％左右為宜。同時(shí)由于剛移栽的小苗莖稈脆嫩，應(yīng)盡量采用噴霧澆水，水量不宜過(guò)大，干后再噴。移栽初期遮光50％，1周后逐漸增加光強(qiáng)。這樣試管苗移栽成活率可達(dá)90％~100％。

防止蚜蟲(chóng)的危害：草莓脫毒苗的繁殖要重點(diǎn)防止病毒的再度污染。由于草莓病毒主要是通過(guò)蚜蟲(chóng)吸吮汁液而傳播的，所以要做好蚜蟲(chóng)防治工作。用馬拉松乳劑、氧化樂(lè)果乳劑等殺蟲(chóng)劑，防治期在5～6月和9～10月，特別是9～10月防治可阻止蚜蟲(chóng)的越冬。

編者按：本文來(lái)自陳莉主編《植物生物工藝學(xué)》，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，由小編整理發(fā)布，如有不妥，敬請(qǐng)告知！